Manipulació, fixació i transport estandarditzats de mostres de biòpsia de mama

https://www.mayoclinic.org/tests-procedures/breast-biopsia/about/pac-20384812

Alta{0}}qualitatbiòpsia de mamadepèn no només de la precisió del radiòleg, sinó també de la manipulació estandarditzada de la mostra per part del patòleg. Cada pas, des de l'extracció de teixits fins a la preparació de la diapositiva, pot afectar el diagnòstic final. Aquest article fa un seguiment del viatge de la mostra, detallant com assegurar-se que cada mostra proporcioni informació de diagnòstic precisa.

1. Recuperació de mostres i inspecció inicial

En disparar, el metge obre l'osca de l'agulla per recuperar l'espècimen preciós-un nucli de teixit petit, típicament grisenc-blanc o groguenc, semblant a una corda-.

• Examen brut:Avalueu primer la integritat. Els nuclis CNB ideals són cilíndrics, d'1 a 1,5 cm de llarg, ~1 a 2 mm de diàmetre. Els exemplars fragmentats i granulosos poden indicar una mala orientació (p. ex., un centre de calcificació) o problemes tècnics.
• Comprovació de quantitat:Registreu el nombre de nuclis recuperats. Es requereixen un mínim de 3-4 nuclis per donar suport a la histologia rutinària, la immunohistoquímica i les possibles proves moleculars.

2. Fixació ràpida i adequada: importància primordial

La fixació és el primer i més important pas químic en el processament de mostres. Mata ràpidament les cèl·lules, coagula proteïnes, prevé l'autòlisi/putrefacció i preserva de manera òptima la microarquitectura.

• Elecció fixadora:​ Formalina tamponada neutra al 10% (NBF)és l'estàndard absolut. Excel·lent penetració, fixació uniforme, bona tinció nuclear/citoplasmàtica.Maiutilitzeu alcohol, glutaraldehid o altres solucions no estàndard-.
• Temporització:Les mostres s'han de col·locar en fixadorimmediatamenta l'extracció. La fixació retardada provoca la degradació de l'ADN, comprometent l'IHC i els resultats moleculars.
• Relació de volum:El volum fixador ha de ser4-10 vegadesel volum de la mostra. Crític per a nuclis petits. Un fixador insuficient exhaureix la capacitat d'amortiment, redueix el pH, acidifica el teixit i destrueix l'antigenicitat.
• Durada:Fixació ideal:6-48 hores. Sota-fixació (<6h) causes soft, difficult-to-section tissue. Over-fixation (>72h) corre el risc d'"emmascarament d'antigen", perjudicant la tinció d'IHC.

3. Protocol de transport estandarditzat

• Contenidor:​ Contenidors de mostres a prova de-fuites i tancats de manera segura.
• Etiquetatge:Les etiquetes han d'incloure el nom del pacient, la identificació, el lloc de la biòpsia (mama esquerra/dreta, quadrant), el tipus de mostra (CNB/VAB), la data i el metge que fa la comanda. L'etiquetatge ambigu és una de les principals causes de barreges-de mostres.
• Formulari de sol·licitud:La font principal d'informació clínica del patòleg. Cal detallar: troballes clíniques, descripció de la imatge (categoria BI-RADS), antecedents o cirurgia de mama, teràpia hormonal i nota breu del procediment.

Transport:​ Assegureu els contenidors en transportadors dedicats per evitar vessaments. Eviteu sacsejades vigoroses durant el trànsit per preservar l'arquitectura fràgil del teixit.

4. A-Processament de laboratori

• Rebut i verificació:​ El personal de patologia -verifica l'etiqueta de la mostra amb els detalls de la sol·licitud.
• Deshidratació i neteja:Els processadors de teixits automatitzats executen mostres a través d'alcohols graduats (deshidratació), xilè (eliminació) i cera de parafina fosa (~ 12-16 hores).
• Incrustació:El teixit infiltrat s'orienta en cera fosa dins d'un motlle, es refreda per formar un bloc de parafina.Crític per als nuclis:Orienta la tira de teixitperpendiculars​ a la cara del bloc per maximitzar la-visualització transversal de les diapositives.
• Secció i tinció:El micròtom talla seccions de 4 a 5 μm del bloc, les munta sobre portaobjectes de vidre, taca amb hematoxilina i eosina (H&E) i cobreobjectes. Els patòlegs examinen amb microscòpia de llum.

5. Circumstàncies especials

• Sospita de limfoma:Reserveu teixit fresc o utilitzeu fixadors especialitzats (per exemple, ARNmés tard) per a citometria de flux/estudis genètics.
• Proves d'ER/PR:Alta sensibilitat al temps/temperatura de fixació; El compliment estricte dels protocols és obligatori.
• Prova HER2:​ Si l'IHC és 2+, cal confirmar FISH; exigeix ​​els més alts estàndards de qualitat de fixació.

Conclusió:Un informe de patologia precís comença amb la biòpsia, es basa en la fixació i culmina amb una microscòpia experta. Una estreta col·laboració entre metges i patòlegs, juntament amb una estandardització rigorosa de tota la fase pre-analítica, constitueix la base d'un diagnòstic precís de la malaltia de la mama.